En la tercer semana medimos la concentración de proteínas en la piel de los ratones por el método de Bradford, el cual consistía en el trazado de una curva de calibración con albumina con un espectrofotmetro, pero antes obtubimos las proteínas y para esto se hacia el homogenato a partir de una capa delgada de la piel interna del animal. Luego ,se traza la curva de calibración para poder hubicar nuestras muestras en la curva segun su concentracion. Ttomamos 5, 10 , 15 y 20 micro litros de albumina 1mg/ml y se los llevaba a 50 micro litros de agua, se le agregaban 950 micro litros del reactivo de Bradford y se leían en un espectrofotometro a 595 nm, los resultado de la curva fueron:
Después tomamos nuestras muestras del homogenatos en concentración de 300.000 Macrofagos o 500.000 Macrofagos en 0,1 ml de medio estimulados o no con LPS. Tambien hubo un animal control al cual no se le inocularon celulas.
Luego sacamos la concentración de proteínas en nuestras muestras mediante una tabla de Exel
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